DREADD 用に DCZ を調整

original paper

DCZ

mouse, monkey で使用可能

i.p. injection で，10 min くらいから効き始め（hM3Dq の場合）

5 min くらいから効き始めるが，20－150 min で効果 max

4 h 立つとほぼほぼ baseline に戻る．

protocol

精密天秤で 1mg 以下程度に粉を分注，-20℃で保存．

分解されやすいので，使用前に調整

溶かした後どのくらい持つのか不明（要検討）

Prepared at time of use

1 ug / kgBW で ip injection （マウスの場合），なので，マウス 20 g に大して 20 ng 程度

20 ng / 200 uL 程度の濃度に調整して使用

x100000 で　1ug/kgBW になる．

DMSO で 1% に希釈

1mg だったら，100 uL の DMSO (1mg/100uL)で溶かす

DMSO は融点が高い (19℃) ので冷凍庫から取り出してすぐのチューブ に入れると凍る．

1mL (999 uL) の Saline で，DCZ/DMSO 1 uL (10 ug 分) を希釈 ( x1000: 10ng / uL)

injection 用に，500 uL 程度の希釈液を作成．

495 uL の Saline で， 5 uL のDCZ (50 ng 分) を希釈（x100: 50 ng/500 uL)

マウスの体重 x10 uL を i.p. で．

Awake で実験するとき，head fix のまま ip するのは結構大変なので，打つ前に，イソフルを軽くかがせてから．

記録はイソフル覚めるまで待ってから．

100 ug/kgBW version

DMSO で 1% 希釈

1mg DCZ/ 100 uL DMSO (1mg/100uL)

1mL Saline で，DCZ/DMSO 1uL を希釈（x1000: 10ng/uL)

1st resuts, ******

1. AAV1-hSyn-somaGCaMP@V1

9日目でかなり明るい．発現が強すぎるさ細胞もパラパラいる．

Doxorubicin の濃度を下げる (例えば半分の 5 ug/

2nd trials,